Thesis by BEN ABDENNEBI Hassen
Optimisation de la viabilité du greffon hépatique de rat : étude sur le modèle de foie isolé perfusé
Defended on 6 april 1998
Optimisation de la viabilité du greffon hépatique de rat : étude sur le modèle de foie isolé perfusé
Soutenue le 6 April 1998
Le principal objectif de la conservation d'organes est de permettre la reprise immédiate et complète des fonctions du greffon après transplantation. Les études effectuées dans cette perspective montrent que les lésions subies par un greffon dépendent de plusieurs facteurs que l'on peut analyser avec un modèle d'organe isolé perfusé. Nous avons donc mis au point une technique de prélèvement et un dispositif adaptés au foie de rat. Nous avons pu vérifier que le lavage hépatique par l'aorte respecte mieux l'intégrité du parenchyme hépatique que le lavage par la veine porte. En outre, nous avons montré que plus on enrichit le liquide de perfusion en molécules énergétiques, plus on améliore l'état métabolique du foie. Le milieu de William's, riche en acides aminés et en vitamines, est plus adapté que le liquide Krebs-Henseleit pour la perfusion hépatique. Nous avons ensuite comparé 2 solutions de conservation : la solution UW, riche en potassium, high-K+ UW et high-Na+ UW, solution identique mais enrichie en sodium. Les résultats montrent, qu'après 24 h de préservation à 4°C dans high- Na+ UW, les foies libèrent moins de créatine kinase-BB (CK-BB) et de transaminases dans le perfusat qu'en présence de high-K+ UW, tandis que la clairance du vert d'indocyanine (ICG) et le débit biliaire sont augmentés. De plus, nous avons conservé les foies dans les 2 solutions de préservation pendant 24 h à 4°C, puis nous les avons perfusés par le liquide Elohes, le milieu de William's enrichi (Wif) ou la solution de rinçage Carolina (CRS). Nous avons observé que les lésions des cellules non parenchymateuses, estimées par la CK-BB, augmentent si les foies sont conservés dans high-K+ UW. Dans ce cas, l'efficacité des solutions de perfusion est la suivante : CRS > Wif > Elohes. En revanche, après conservation dans high-Na+ UW, elle devient : CRS = Wif > Elohes. Enfin, la clairance d'ICG est plus forte après conservation dans high-Na+ UW et rinçage avec CRS. En conclusion, cette étude montre qu'une solution de type extracellulaire est plus efficace pour conserver le greffon hépatique que celle de type intracellulaire. L'association high-Na+ UW/CRS réduit encore plus les lésions de reperfusion. Enfin, la clairance d'ICG et le dosage de la CK-BB dans le perfusat sont d'excellents critères de l'intégrité fonctionnelle du foie.
Defended on 6 april 1998
Optimisation de la viabilité du greffon hépatique de rat : étude sur le modèle de foie isolé perfusé
Soutenue le 6 April 1998
Le principal objectif de la conservation d'organes est de permettre la reprise immédiate et complète des fonctions du greffon après transplantation. Les études effectuées dans cette perspective montrent que les lésions subies par un greffon dépendent de plusieurs facteurs que l'on peut analyser avec un modèle d'organe isolé perfusé. Nous avons donc mis au point une technique de prélèvement et un dispositif adaptés au foie de rat. Nous avons pu vérifier que le lavage hépatique par l'aorte respecte mieux l'intégrité du parenchyme hépatique que le lavage par la veine porte. En outre, nous avons montré que plus on enrichit le liquide de perfusion en molécules énergétiques, plus on améliore l'état métabolique du foie. Le milieu de William's, riche en acides aminés et en vitamines, est plus adapté que le liquide Krebs-Henseleit pour la perfusion hépatique. Nous avons ensuite comparé 2 solutions de conservation : la solution UW, riche en potassium, high-K+ UW et high-Na+ UW, solution identique mais enrichie en sodium. Les résultats montrent, qu'après 24 h de préservation à 4°C dans high- Na+ UW, les foies libèrent moins de créatine kinase-BB (CK-BB) et de transaminases dans le perfusat qu'en présence de high-K+ UW, tandis que la clairance du vert d'indocyanine (ICG) et le débit biliaire sont augmentés. De plus, nous avons conservé les foies dans les 2 solutions de préservation pendant 24 h à 4°C, puis nous les avons perfusés par le liquide Elohes, le milieu de William's enrichi (Wif) ou la solution de rinçage Carolina (CRS). Nous avons observé que les lésions des cellules non parenchymateuses, estimées par la CK-BB, augmentent si les foies sont conservés dans high-K+ UW. Dans ce cas, l'efficacité des solutions de perfusion est la suivante : CRS > Wif > Elohes. En revanche, après conservation dans high-Na+ UW, elle devient : CRS = Wif > Elohes. Enfin, la clairance d'ICG est plus forte après conservation dans high-Na+ UW et rinçage avec CRS. En conclusion, cette étude montre qu'une solution de type extracellulaire est plus efficace pour conserver le greffon hépatique que celle de type intracellulaire. L'association high-Na+ UW/CRS réduit encore plus les lésions de reperfusion. Enfin, la clairance d'ICG et le dosage de la CK-BB dans le perfusat sont d'excellents critères de l'intégrité fonctionnelle du foie.
